Practica No. 9 prueba de aglutinación en sangre.
Etapa preanalitica
La sangre es un tejido conectivo que posee sustancias intracelular líquido y que circula por vasos sanguíneos. Es mas densa y viscosa que el agua, su temperatura es de 38ºc, y su PH es levemente alcalino 7.35 a 7.45
Función:
· Transporte: transporta oxígeno desde los pulmones a los tejidos y dióxido carbono de los tejidos a los pulmones.
· Regulación: la sangre ayuda a regular el PH mediante sustancias amortiguadoras.
· Protección: la sangre puede coagularse, lo cual evita su salida excesiva del sistema cardiovascular cuando ocurren lesiones y con la producción de anticuerpos brinda protección contra enfermedades.
| Eritrocitos, Hematíes o Glóbulos Rojos |
Células(Vivas) |
| Leucocitos o Glóbulos Blancos |
| Sangre |
Elementos Formes:(Suspendidos en el plasma) |
| Plaquetas o trombocitos |
| Fragmentos |
Formación de Células Sanguíneas
El proceso por el cual se producen los elementos formes de la sangre es la hemopoyesis o hematopoyesis. Un 0,05 a0,1 % de las células de la médula ósea roja son células madres pluripotenciales, derivadas del mesenquima. Estas células se replican, proliferan y se diferencian en los tipos celulares que son origen de todos los elementos formes de la sangre.
Las células madres pluripotenciales originan otros dos tipos de células madres:
· Mieloides: su desarrollo comienza en la médula ósea roja y de ella provienen los eritrocitos, plaquetas, monocitos, neutrófilos, eosinófilos y basófilos.
· Linfoides: inician su desarrollo en la médula ósea roja pero lo completan en los tejidos linfáticos y son el origen de los linfocitos.
Durante la vida embrionaria y fetal, el saco vitelino, hígado, bazo, timo, ganglios linfáticos y médula ósea roja participa en la producción de los elementos formes de la sangre, después del nacimiento, la hemopoyesis solo ocurre en la médula ósea roja que se encuentra en la epífisis de huesos largos (fémur, húmero), huesos planos (esternón, costillas, huesos del cráneo, vértebras y pelvis).
Salvo los linfocitos, los elementos formes no se dividen una vez que salen de la médula ósea.
La Hemoglobina
Es un componente de los hematíes y está compuesto de una proteina llama hemo (formado por 4 pirroles + hierro) y otra llamada globina(formada por una cedena alfa y una cadena beta). ). Es el pigmento rojo que da el color en la sangre cuya función es transportar oxígeno de los pulmones a los tejidos y dióxido de carbono de los tejidos a los pulmones.
Los valores normales en el hombre son (16g/dl) y en la mujer (14g/dl).
| 2cadenas alfa+ 2 cadenas beta+ el grupo hemo forman la molécula de hemoglobina. |
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ELEMENTOS FORMES
| Nombre y aspecto | Número | Características | Funciones |
| Eritrocitos o Hematíes | 4.800.00mm3 mujeres 5.400.00mm3 hombres | Discos bicóncavos de 7 a 8 micrones, sin núcleos, viven 120 días. | La hemoglobina transporta O2 de los pulmones a los tejidos y CO2 de los tejidos a los pulmones. |
| Nombre y aspecto | Número | Características | Funciones |
| Leucocitos: 5.000.000mm3, viven unas cuantas hs, hasta varios días. Combaten los microorganismos patógenos y diversas sustancias extrañas que entran al cuerpo. | |||
GRANULOCITOS | |||
| Neutrófilos | 60 a 70 % | 1 0 a 12 pm núcleo con dos a cinco lóbulos | Fagocitosis. Destrucción de bacterias, ayuda a iniciar el proceso inflamatorio. |
| Eosinófilos | 2 al 4 % | 10 a 12 pm, núcleo con dos a tres lóbulos | Fagocitan complejos antígeno-anticuerpo y destruyen ciertos parásitos. |
| Basófilos | 0,5 a 1% | 8 a 10 pm, núcleo con dos lóbulos | Liberan heparina, histamina y serotonina, que intensifican la respuesta inflamatoria en las reacciones alérgicas. |
| AGRANULOCITOS | |||
| Linfocitos (células T, B y asesinas naturales) | 20 a 25 % | Los linfocitos pequeños miden entre 6 a 9 pm y los grandes de 10 a 14 pm, con núcleo redondo. | Las células B, se transforman en células plasmáticas, que secretan anticuerpos. Las células T, atacan los virus invasores, células cancerosas y células de transplantes. Las células asesinas naturales atacan a microbios infecciosos y ciertas células tumorales. |
| Monocitos | 3 a 8 % | 12 a 20 pm, núcleo en forma de riñón. | Fagocitosis, después de su transformación en macrófagos fijos o libres. |
| Nombre y aspecto | Número | Características | Funciones |
Plaquetas | 150.000.000 a 400.000.000mm3 | Fragmentos celulares de 2 a 4 pm que viven 5 a 9 días, no tienen núcleo, si numerosos gránulos. | Forman trombos hemostáticos en la hemostasia, liberan sustancias que estimulan el vasoespasmo y la coagulación. |
Dictado del profesor e indicaciones practica No. 9 Etapa preanalitica
Prueba de aglutinación de sangre Tipo de prueba: tipo sanguíneo
El alumno de laboratorio de análisis clínicos debe realizar una prueba en Tejido sanguíneo (HB) para poder conocer, observar identificar y finalmente aplicar la prueba de aglutinación en sangre que da como resultado el tipo sanguíneo del individuo.
Materiales
† Sangre fresca 2.5ml
† Tubo de tapón morado con anticoagulante
† Palillos de madera
† Placa de porcelana escavada para tipo sanguíneo
† Algodón con alcohol (2 torundas sin alcohol)
† Masquen tape para etiquetar placa
† Tipificadores para tipo sanguíneo (reactivo), AntiA, AntiB, AntiD.
† Papel secante, papel para cubrir mesa
† Mesa de laboratorio
† Pipeta Pasteur (bulbo)
Desarrollo prueba de aglutinación
1. Tecnica de venopuncion
2. Una vez obtenida la sangre fresca del paciente en volumen de 2.5 ml, se trasvasa al tubo de tapón morado con anticoagulante en el que se le dan ligeros movimientos para que se mezcle con el anticoagulante y poder ser utilizada. Se utiliza la pipeta Pasteur con bulbo de extracción y se extrae una cantidad de sangre del tubo ya indicado para puntear una pequeña gota en cada excavación en la placa de porcelana, el resto de sangre se deposita en el tubo, se enjuaga a la pipeta y se conserva cuidadosamente. Una vez punteada la placa escavada de porcelana se le agrega una gota de reactivo en cada excavación para poder obtener una reacción entre sangre y suero sanguíneo.
1. Se aplica el reactivo AntiA como numero 1 es de color
2. Se aplica el AntiB como numero 2 una ves obtenida la prueba de aglutinación debemos reportar nuestro trabajo dentro del marco, pre analítico, analítico, y pos analítico.
NOTA
Las pruebas realizadas desde medio de cultivo practica #1 asta la practica #9 serán reportadas en forma ordenada, con separadores internos de practica y una pestaña del lado derecho superior del documento indicando el numero de practica y nombre.
Durante el trayecto de este trabajo el alumno debe clasificar sus practicas acomodándolas de tal forma en cada 1 de las etapas ya mencionadas pre analítica, analítica, pos analítica, ósea que las practicas deben de estar dentro de este marco mencionado.
La practica final de aglutinación en plasma y aglutinación en sangre deben tener el marco de pre análisis, análisis y pos análisis.
Prueba analítica.
INTRODUCCION: Las llamadas reacciones febriles son un grupo de pruebas de aglutinación que investigan la presencia en el suero del paciente, de anticuerpos contra cepas bacterianas patógenas que causan la fiebre de tifoidea, paratifoidea y brucelosis. Debido a que es común encontrar resultados positivos en la mayoría de los pacientes a los que se les realiza este estudio, se analizaron resultados de 360 pacientes remitidos por sus médicos para este análisis por presentar manifestaciones clínicas de infecciones que investigan estos estudios, comparándolos posteriormente contra 182 análisis practicados a sujetos sanos.
OBJETIVO: la razón de ser de esta practica es para que podamos conocer los tipos sanguíneos de las personas o conocer si presenta algún tipo de enfermedad.
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Sangre fresca.
Una jeringa
Tuco de ensaye con tapón morado.
Una laminilla de cristal para pruebas serológicas
Tubo de ensaye vacio
Torundas de algodón
Palillos de madera.
Lo primero que se realizo fue la toma de muestra del paciente, primero se le coloca el torniquete, de una forma que quede ajustado pero que no lastime, de una forma en que sea fácil de retirar.
Se le da la indicación al paciente de que agá movimientos con su mano y muñeca, apretando y soltando para que así salga a relucir la vena. En el momento que esta este hinchada es porque ya esta llena de sangre así que se desinfecta con una torunda de algodón alcoholizada a todo alrededor del área.
Con el brazo del paciente estirado, el laboratorista lo toma por la parte posterior de codo así será mucho mas fácil tomar la muestra se introduce la aguja lentamente y en forma acostada, nunca directamente de arriba abajo solo acostada, y ya estando adentro se comienza a extraer la sangre en este caso fueron 5 ml. Ya que se utilizaran 2 ml para la prueba de aglutinación de sangre y 3 ml. Para la prueba de aglutinación en suero plasmático. Por ultimo se retira el torniquete, se retira la jeringa y de coloca una torunda de algodón alcoholizada y se le pide al paciente que flexione su brazo.
Para la aglutinación en suero plasmático se depositan 2ml. En el tubo con tapón morado con anticoagulante se mueve para que se mezclen bien, después con una pipeta Pasteur con bulbo se toma una muestra de la sangre de ese tubo y se coloca una gota en tres de los espacios de la placa de porcelana excavada.
El paso siguiente es adherir los tipificadores para tipo sanguíneo (reactivos) anti A anti B y anti D de izquierda a derecha en ese orden. Se empiezan a mezclar con los palillos de madera y ahí se empieza a ver la coagulación en cada uno de los reactivos y ahí es donde nos damos cuenta que tipo es, A, B, D
En nuestro caso fue el tipo A.
Ya terminado eso nos fuimos directamente con la prueba de aglutinación en suero plasmático, la cual se realizo con el resto de la sangre 3 ml. Se colocaron en el tubo con tapón rojo sin anticoagulante la cual no se mezcla, se retiro el tapón rojo y se metieron a la centrifuga por 5 min. En orden junto con las de las otras mesas, previamente etiquetada con el núm. de mesa. Al terminar tomamos nuestra muestra ya separada la sangre del suero plasmático y con mucho cuidado se vacio el suero en un tubo de ensaye limpio y la sangre restante de desecho de acuerdo a la norma 087 RPBI.
Con una pipeta Pasteur previamente limpia se toma un poco de suero y se coloca en 6 espacios de la placa de cristal para pruebas serológicas, entonces se le agregan los reactivos febriles: H, O, A, B, brucella abortus 0x19. En su respectivo orden y se mezcla con los palillos de madera, uno diferente para cada mezcla, después se toma la lamina y se observa en el microscopio para saber si existe alguna anormalidad.
Por ultimo todos los materiales utilizados se desechan cada uno a su respectivo contenedor dependiendo de lo que sea el desecho de acuerdo a la norma 087 RPBI.
Etapa pos analítica.
CONCLUSION: las pruebas de aglutinación tanto en plasma con en sangre son muy importantes para poder conocer desde nuestro tipo sanguíneo hasta si por desgracia padecemos alguna enfermedad, infección o cualquier tipo de amenaza a la salud, asi como el embarazo son muy útiles y es lo principal que debe saber un laboratorista.
